Šaldytos ožių spermos tyrimai
Ambrazaitytė, Ona |
Recenzentas / Reviewer | |
Komisijos sekretorius / Committee Secretary | |
Komisijos pirmininkas / Committee Chairman | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member |
Darbo tikslas: įvertinti atšildytos ožių spermos kokybinius rodiklius po kriokonservavimo, palyginti parametrus, tirtus iš karto po atšildymo bei praėjus 2 valandoms po inkubacijos 37°C temperatūros vandens vonelėje bei palyginti rezultatus tarp dviejų pieninių ožių veislių. Buvo tirti 7 pieninių veislių ožiai (4 Zaaneno veislės ir 3 Alpių veislės). Kiekvieno ožio buvo analizuojami 2 spermos mėginiai: vienas tirtas iš karto po atšildymo, kitas – praėjus 2 valandoms inkubavimo vandens vonelėje, palaikiusioje 37°C temperatūrą. Tiriami parametrai: spermatozoidų koncentracija spermos dozėje (mikroskopuojant ir SCA metodu), spermatozoidų judėjimo parametrai (subjektyviai ir SCA metodas), spermatozoidų gyvybingumas (mikroskopija) bei morfologija (mikroskopija). Tyrimo metu nustatyta, kad vidutinė visų ožių spermatozoidų koncentracija dozėje buvo 424,71 ± 15,11× 106. Didžiausia koncentracija buvo Alpių veislės ožių (459,00 ± 2,31 × 106 spermatozoidai dozės mililitre). Spermatozoidų judrumo procentas po atšildymo buvo 57,14 ±1,55. Alpių ožių judrumas tiek po atšildymo, tiek praėjus 2 valandoms inkubacijos išliko vienodas (60 proc.), o Zaaneno veislės ožių iš 55 proc. sumažėjo iki 43,75 proc. Vidutinis visų ožių spermatozoidų progresyvaus judėjimo vidurkis po atšildymo siekė 52,57 ± 2,19 proc. Didžiausias progresyvus spermatozoidų judėjimas po atšildymo buvo Alpių ožių (65 proc.). Abiejų veislių ir bendras visų ožių spermatozoidų gyvybingumas iš karto po atšildymo buvo vienodas (68 proc.) vertinant eozino – nigrozino dažymo metodu. Po dažymo SYBR-14/PI dažais aukščiausias vidurkis buvo Alpių veislės ožių (4,43 proc. didesnis nei visų ožių ir 7,75 proc. didesnis nei Zaaneno veislės ožių(p < 0,05)). Praėjus 2 valandoms inkubavimo mažiausiai pakito Alpių veislės procentas (nukrito 1 proc. (p < 0,05)). Bendras vidutinis patologinių spermatozoidų kiekis vienoje dozėje po atšildymo buvo 9,43± 2,80 proc. Mažiausias spermatozoidų patologijų dozėje vidurkis buvo Alpių ožių spermoje (3,33 ± 1,20 proc.). Dažniausiai pasitaikiusios buvo kitos patologijos (palaidos patologinės galvutės, akrosomų pakitimai, distaliniai ir proksimaliniai lašeliai) – Zaaneno ožių spermoje šis patologijų vidurkis siekė 8,50 ± 2,60 proc. (7,84 proc. didesnis nei bendras ožių vidurkis (p < 0,05)).
The purpose of this paper was to evaluate buck semen quality parameters after cryopreservation, compare sperm quality rates just after thawing and after incubating semen for 2 hours in water bath with temperature maintained at 37°C, additionally assessing sperm parameters between two dairy goat breeds. Sperm was analysed from 7 different bucks (4 Saanen and 3 Alpine breed). There were 2 samples of each buck’s sperm – one was examined right after thawing, other one – after 2 hours incubation at water bath maintaining 37°C temperature. Evaluated criteria: sperm concentration (microscopy and SCA method), sperm motility parameters (subjectively and using SCA), spermatozoa membrane integrity (microscopy) and morphology (microscopy). It was determined that mean spermatozoa concentration in one sample was 424.71 ± 15.11 × 106. The highest concentration index was detected in Alpine buck sperm (459.00 ± 2.31 × 106). The average motile spermatozoa percentage after thawing was 57.14 ±1.55. Alpine buck spermatozoa motility did not fluctuate throughout the experiment, it remained at 60 %. Whereas Saanen buck sperm motility from 55 % dropped to 43.75 %. The average progressive motility of all buck samples after thawing was 52.57 ± 2.19 %. The highest progressively moving spermatozoa percent was in Alpine breed (55 %). After carrying out an analysis of spermatozoa membrane integrity with eosin – nigrosin stain, the results displayed that both breeds, also the average of the whole group, was the same after sperm thawing (68 %). After sample staining with SYBR–14/PI, the highest membrane integrity percentage was found in Alpine breed (4.43% higher than whole group’s average, and 7.75 % higher than in Saanen bucks(p < 0.05)). After 2 hour incubation in water bath the least affected percentage of viable spermatozoa was found in Alpine breed (parameter decreased by 1%(p < 0.05)). The average percent of post–thaw pathological spermatozoa morphology in one sperm sample of all tested bucks was 9.43 ± 2.80. The least spermatozoa with morphological pathologies were found in Alpine buck semen (3.33 ± 1.20 %). The most frequently discovered pathologies were other type (detached head, acrosome defects, distal and proximal droplets) and the highest percentage was found in Saanen breed 8.50 ± 2.60 % (7.84 % higher than average of all bucks(p < 0.05)).